名  称

主要成分及配制

应    用

原     理

注 意 事 项

碘液

KI、I₂

 

配制：将2g碘化钾放入5ml蒸馏水中，加热溶解后再加入1g碘，加蒸馏水稀释至300ml）

1“光合作用”实验中，用于鉴定淀粉的生成（教材第一册P52）；

2“温度对酶活性的影响”实验中，用于鉴定淀粉是否分解（教材第三册P8）。

多数淀粉是由20%~25%的直链淀粉和75%~80%的支链淀粉组成。直链淀粉借助分子内部的氢链卷曲成螺旋状。I₂会嵌入到螺旋结构的空隙处，并形成一种稳定的淀粉—碘络合物。这种淀粉—碘络合物能够比较均匀地吸收除了蓝光以外的长波光，从而使淀粉呈现蓝色。

1直链淀粉初步水解得到的糊精分子仍较大，遇碘显蓝色，继续水解得分子较小的糊精，遇碘显红色，再水解变成分子更小的无色糊精，遇碘不显色。

2支链淀粉遇碘产生紫红色。

双缩脲试剂

A液：2ml质量浓度0.1g/mlN_aOH；

 

B液：3~4滴质量浓度0.01g/mlC_USO₄

在“生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定”实验中，作为鉴定生物组织中蛋白质的存在（教材第一册P17）。

在浓碱溶液中，双缩脲（NH₂—CO—NH—CO—NH₂）与硫酸铜结合生成紫色或紫红色的复合物。

蛋白质分子中含有多个与双缩脲结构类似的肽键。

1使用时先加入A液摇匀后，再加入B液。

2凡有两个或两个以上的肽键结构的化合物都有此反应，故也可用于鉴定肽的存在。

二苯胺

A液：1.5g二苯胺溶于100ml冰醋酸中，再加1.5ml浓硫酸，用棕色瓶保存。

 

B液：乙醛的体积分数为0.2%的溶液。

 

配制：将0.1mlB液加入到10mlA液中，现配现用。

在“DNA的粗提取与鉴定” 实验中，作为鉴定DNA的试剂（教材第二册P6）。

DNA中嘌呤核苷酸上的脱氧核糖遇酸生成ω—羟基—γ酮基戊醛，它再和二苯胺作用而显现蓝色（液体呈浅蓝色）。鉴定时溶液蓝色的深浅与溶液中DNA含量有关。

可用于鉴定脱氧核糖、脱氧核糖核苷酸的存在。

伊红美蓝

伊红；美蓝

用以鉴别饮用水和乳制品中是否存在大肠杆菌等细菌（教材第三册P80~81）。

大肠杆菌代谢产物（有机酸）可与伊红和美蓝结合，使菌落呈深紫色，并带有金属光泽。

一般加入培养基中，做成鉴定培养基。

斐林试剂

甲液：2ml质量浓度0.1g/mlN_aOH；

 

乙液：4~5滴质量浓度0.05g/mlC_USO₄。

 

配制：将4~5滴乙液滴入2ml甲液，配制而成。

1在“生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定”实验中，作为鉴定生物组织中还原糖的存在（教材第一册P17）。

2在“探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用”实验中，作为判断淀粉、蔗糖是否水解的指示剂（教材第一册P47）。

N_aOH与C_USO₄混合后，立即生成淡蓝色的C_U(OH)₂沉淀，C_U(OH)₂与加入的葡萄糖在加热的条件下，能够生成砖红色的C_U2O沉淀，而葡萄糖本身则氧化成葡萄糖酸。

用斐林试剂鉴定还原性糖时，溶液的颜色变化过程为：浅蓝色→棕色→砖红色。

斐林试剂极不稳定，其甲液和乙液需分别配制储存，使用时再临时混合。

班氏试剂

柠檬酸钠、无水碳酸钠、CuSO₄

 

配制：取柠檬酸钠86.5g和无水碳酸钠50g放入1000ml锥形瓶中，加水350ml，加热溶解。另取100ml锥形瓶加入硫酸铜8.65g，加水约50ml，加热溶解。待两者冷却至室温，将硫酸铜溶液慢慢倒入前液，同时搅匀，并补足水量至500ml。

在“尿糖的测定” 实验中，作为测定尿糖含量的指示剂（教材第三册P12）。

硫酸铜与硫酸钠和柠檬酸钠相遇，能产生出一种可溶性的又能离解出Cu²⁺的可溶性络盐，即柠檬酸钠此时能防止氢氧化铜沉淀的形成，做了一种亲水性掩蔽络合物形成剂。当利用班氏试剂测定还原性糖时，还原性糖在这种碱性溶液中能将Cu²⁺还原为Cu⁺，Cu⁺ 再与OH^-合成黄色的CuOH，加热后 CuOH即变成砖红色的Cu₂O沉淀。

班氏试剂较稳定，配制好以后可较长时间保存。

龙胆紫

龙胆紫

 

配制：将龙胆紫溶解在质量分数为2%的醋酸溶液中配制而成。

在“观察植物细胞有丝分裂” 实验中用以着色染色体（教材第一册P39）。

碱性染料容易让染色体（质）着色。

染色时间不能过长。

醋酸洋红

醋酸、洋红

 

配制：45%醋酸100ml，加洋红1g，煮沸（沸腾时间不超过30秒），冷却后过滤即成。

在“观察植物细胞有丝分裂” 实验中用以着色染色体（教材第一册P39）。

碱性染料容易让染色体（质）着色。

染色时间不能过长。

结晶紫

结晶紫

 

配制：将2g结晶紫溶于20ml体积分数为95%的酒精。

在“自生固氮菌的分离（选做）” 实验中用以给细菌着色（教材第三册P91）。

细菌细胞通常带负电荷，结晶紫染液是一种盐，电离时染料离子带正电，易与带负电荷的细菌结合而使细菌成紫色，易于在显微镜下进行观察。

染色时间不能过长，否则染色过深，不易观察细菌结构。

苏丹Ⅲ

苏丹Ⅲ

 

配制：将0.1g苏丹Ⅲ干粉溶于100ml体积分数为95%酒精中，待全部溶解后再使用。

在“生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定”实验中，作为鉴定生物组织中脂肪的存在（教材第一册P17）。

苏丹Ⅲ遇脂肪显橘黄色。

染色时间为2~3分钟。

苏丹Ⅳ

苏丹Ⅳ

 

配制：将0.1g苏丹Ⅳ干粉溶于50ml丙酮中，再加入体积分数为70%的酒精50ml，充分混合后即可使用。

在“生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定”实验中，作为鉴定生物组织中脂肪的存在（教材第一册P17）。

苏丹Ⅳ遇脂肪显红色。

苏丹Ⅳ染液与脂肪的亲和力比较强，所以染色时间应比较短，一般为1分钟左右。

亚甲基蓝

亚甲基蓝

1细胞的活体染色剂；

2水污染程度指示剂；

3氧气检测剂。

1一种蓝色染料，0.01%亚甲基蓝对细胞无毒害；

2亚甲基蓝（一种有机物小分子）在水中离解成亚甲基蓝的阳离子（呈蓝色）和氯离子（呈无色），亚甲基蓝阳离子可通过主动运输进入到细菌体内，在酶的作用下被细菌分解成无色的小分子，使蓝色褪去，褪色程度越大，说明细菌越多，水污染越严重。

3亚甲基蓝是氧化还原指示剂，在有氧的环境中蓝色褪去。